Articles

نقش کلسترول و هورمونهای استروئیدی در مقاومت هلیکوباکترپیلوری در برابر تنش pH ، نمک و حرارت

10/11/2023 10:19:34 PM
Introduction

هلیکوباکترپیلوری کلسترول را جذب، گلوکوزیله و بشکل کلستریل گلوکوزید در غشای خود وارد می‎کند. این تغییرات باعث مقاومت باکتری در مقابل تنش‌ها از جمله آنتی‌بیوتیک‎ها می‎شود. هلیکوباکتر همچنین دارای ویژگی جذب و گلوکوزیله کردن هورمونهای استروئیدی است. هورمونهای استروئیدی در معده انسان وجود دارند. هدف از این مطالعه بررسی نقش کلسترول و هورمونهای استروئیدی در مقاومت هلیکوباکترپیلوری به تنش‎های مختلف نظیر pH اسیدی و قلیایی، غلظت بالای نمک و حرارت می‌باشد.

Method

یک سویه هلیکوباکترپیلوری اسپیرال جدا شده از بیوپسی معده با کدورت استاندارد 2 مک‎فارلند در لوله‎های بروسلا براث با یا بدون 250 میکرومولار کلسترول یا استرادیول و نیز بروسلا براث و 5% سرم با pH 2، 4، 6، 7 و 8 تلقیح شد. در زمانهای 15، 30، 60 دقیقه، 2 و 3 ساعت از لوله‎ها رنگ‎آمیزی گرم انجام شد و 25 میکرولیتر بر روی پلیت‎های بروسلا بلاد آگار با و بدون 250 میکرومولار کلسترول یا استرادیول تلقیح گردید. برای بررسی تنش نمک هلیکوباکتر در محیط بروسلا براث با یا بدون 250 میکرومولار کلسترول یا استرادیول با غلظت های 5، 10 و 15% NaCl تلقیح شد. در زمانهای 15، 30 دقیقه، 2 و 4 ساعت رنگ‎آمیزی گرم انجام شد و 25 میکرولیتر روی پلیت‎های بروسلا بلادآگار با و بدون غلظت مشابه نمک و بلاد آگار حاوی کلسترول یا استرادیول تلقیح گردید. برای بررسی تنش حرارتی هلیکوباکتر در محیط کشت بروسلا براث با یا بدون 250 میکرومولار کلسترول یا استرادیول در معرض حرارت 45، 65، 75 و 95 درجه به مدت 15، 30 و 60 دقیقه قرار گرفت و رنگ‎آمیزی گرم از لوله‎ها انجام شد و بر روی پلیت‎های بروسلا بلادآگار با و بدون کلسترول یا استرادیول تلقیح گردید. پس از 72 ساعت انکوباسیون در شرایط میکروائروبیک رشد کلنی‎های باکتری بررسی و رنگ‎آمیزی گرم از پلیتها انجام شد.

Results

هلیکوباکتر در pHهای 6، 7 و 8 رشد داشت. ولی در pH2 فقط در حضور کلسترول و استرادیول بمدت 15 دقیقه قابلیت رشد داشت. در pH4 به مدت 1 ساعت در غیاب کلسترول و 2 ساعت در حضور کلسترول واسترادیول قابلیت رشد داشت. باکتری در صورت وجود کلسترول و یا استرادیول 5% نمک را به مدت 15 دقیقه تحمل و روی پلیت بلاد آگار با یا بدون کلسترول رشدکرد. در غلظت‎های %10 و 15% حتی در حضور کلسترول رشد نکرد. هلیکوباکتر در لوله‎های حاوی کلسترول یا استرادیول در 45 درجه به مدت 15 دقیقه زنده ماند و روی بلاد آگار با یا بدون کلسترول رشد کرد ولی در 65، 75 و 95 درجه رشد نکرد. باکتریهادر لوله‎ های بروسلا براث با یا بدون سرم در مقابل تنش‎های بررسی شده مقاومتی نداشتند و رشد آنها منفی بود. رنگ‎آمیزی باکتریهایی که روی پلیت‎ها رشد کردند، اشکال اسپیرال را نشان داد.

Conclusion

نتایج این مطالعه نشان داد هلیکوباکتر در حضور کلسترول و استرادیول در pH اسیدی 15 دقیقه تا دو ساعت، در 5% نمک و حرارت 45 درجه برای 15 دقیقه زنده میماند. بنابراین کلسترول و استرادیول نقش محافظتی برای هلیکوباکتر دارند. مطالعات نشان داده است که حذف کلسترول از غشای هلیکوباکتر ساختار و مورفولوژی باکتری را مختل و آنرا در مقابل انواع تنش ها حساس می‎کند.